糖原贮积病

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细胞的十全大补汤 [复制链接]

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细胞培养所用的培养基是众多科研人员凭借专业知识和丰富的经验发展起来的,它一般具有以下功能:使细胞具有极佳的生长率;延长细胞寿命;有分化功能及诱导功能;支持细胞的克隆生长。在实验中,为了使细胞具有极佳的生长速率和生长状态,实验人员会根据不同细胞的特性加入不同的因子以促进细胞的增殖,接下来让我们盘点一下几种除了基础培养基和血清外常用的培养基添加物。

氨基酸(AminoAcids)是蛋白质组成的基本单位,也是构成生命的重要成分。根据细胞自身合成的能力,可将氨基酸分为三类:必需氨基酸、半必需氨基酸和非必须氨基酸。MEM非必需氨基酸溶液(Non-EssentialAminoAcids,NEAA)源自MEM培养基配方,包括L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(门)冬酰胺、L-天(门)冬氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸和甘氨酸7种非必须氨基酸,能有效改善细胞培养基配比,降低细胞培养时细胞自身生产非必须氨基酸的副作用,促进细胞增殖代谢,是细胞培养中常用的添加剂之一。

谷氨酰胺具有重要的免疫调节作用,它是淋巴细胞分泌、增殖及其功能维持所必需的。作为核酸生物合成的前体和主要能源,谷氨酰胺可促使淋巴细胞、巨噬细胞的有丝分裂和分化增殖,增加细胞因子TNF、IL-1等的产生和磷脂的mRNA合成。谷氨酰胺是核酸碱基从头合成的途径的重要原料,如果缺失就会造成细胞合成DNA效率下降,造成细胞分裂减少,抑制细胞增殖。L-谷氨酰胺可作为培养细胞的能量来源、参与蛋白质的合成和核酸代谢。L-谷氨酰胺在溶液中不稳定(在4℃培养溶液中半衰期为3个星期,37℃中为1个星期),L-谷氨酰胺的降解导致氨的形成,而氨对于一些细胞具有毒性,因此需要在使用时加入。一般3个星期左右补一次。

表皮细胞生长因子(EpidermalGrowthFactor),是人体内分泌的一种重要细胞生长因子,有很强的生理活性。EGF是人体内存在的一种生长因子,它的主要功能是促进皮肤细胞的分裂。研究表明:极微量的EGF能强烈刺激细胞生长,抑制衰老基因表达,它还能刺激细胞外的一些大分子(如透明质酸和胶原蛋白等)的合成与分泌。

重组人表皮生长因子(rh-EGF),大量存在于人体上皮细胞内,它可刺激上皮细胞和内皮细胞生长,促使胶原及胶原酶合成,分泌胶原物质、透明质酸和糖蛋白。

氢化可的松,又称皮质醇,是从肾上腺皮质中提取出的是对糖类代谢具有最强作用的肾上腺皮质激素,即属于糖皮质激素的一种。氢化可的松及其他糖皮质激素能提高细胞对有害刺激的应激能力,减轻细菌内毒素对细胞的损害。除此之外,氢化可的松可促进糖原异生、减慢葡萄糖分解、提高蛋白质的分解代谢,大剂量使用会抑制蛋白质合成。

胰岛素可以降低蛋白降解;降低脂肪降解;增加氨基酸的摄入;保持细胞的活性。胰岛素控制着蛋白质、糖、脂肪三大营养物质的代谢和贮存。

①对糖代谢的影响:能加速葡萄糖的利用和抑制葡萄糖的生成,降低血糖。它可以加速葡萄糖的利用,胰岛素能提高细胞膜对葡萄糖的通透性,促进葡萄糖由细胞外转运到细胞内,为组织利用糖提供有利条件,又能促进葡萄糖激酶(肝内)和己糖激酶(肝外)的活性,促进葡萄糖转变为6磷酸葡萄糖,从而加速葡萄糖的酵解和氧化;并在糖元合成酶作用下促进肝糖元和肌糖元的合成和贮存。在抑制葡萄糖的生成方面是抑制肝糖元分解为葡萄糖,以及抑制甘油、乳酸和氨基酸转变为糖元,减少糖元的异生。

②对脂肪代谢的影响:促进脂肪的合成和贮存,抑制脂肪的分解。

③对蛋白质代谢的影响:促进蛋白质的合成,阻止蛋白质的分解。

④胰岛素可促进钾离子和镁离子穿过细胞膜进入细胞内,可促进脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)及三磷酸腺苷(ATP)的合成。胰岛素作用的靶细胞主要有肝细胞、脂肪细胞、肌肉细胞、血细胞、肺脏和肾脏的细胞、睾丸细胞等。

β-巯基乙醇,又称巯基乙醇2-Me。在某些细胞生长分裂的过程中,会向培养基中释放氧自由基。氧自由基积累到一定程度的时候,会破坏细胞膜和细胞器膜,从而杀死细胞。β-巯基乙醇作为一种强还原剂,可以中和掉细胞培养基中积累的氧自由基,这样可以使得细胞分裂到很高的密度而不死亡,从而便于进行细胞增殖实验。β-巯基乙醇的活性部分是硫氢基,其中一个重要作用是使血清中含硫的化合物还原成谷胱甘肽,能诱导细胞的增殖,为非特异性的激活作用。同时避免过氧化物对培养细胞的损害。它还能促进分裂原的反应和DNA合成,增加植物凝集素(PHA)对淋巴细胞的转化作用,已广泛应用于杂交瘤技术,另外,也开始用于一些难以培养的细胞。

当然在实验中添加物不止以上几种,也不是所有的细胞都需要添加,在实验中可根据细胞特性及实验目的选择适合的因子及药物,希望会对你的实验有所帮助。

小海星有专业的细胞技术团队,管他什么细胞、细胞培养基、诱导分化、添加物,都可以为您省心解决~

作者:海星生物

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